用于分析的藥用cannabis植物樣品的制備

（THC）和（CBD）的制備
使用植物基因組學(xué)微孔板

隨著用于醫(yī)藥和研究目的的cannabis合法化程度的提高，對(duì)其有效成分的準(zhǔn)確和高通量分析的需求急劇增加。重要的兩個(gè)是影響神經(jīng)活動(dòng)的 THC 和具有治療作用的鎮(zhèn)痛 CBD。

THC 和 CBD 的比例對(duì)于區(qū)分藥用cannabis和休閑cannabis至關(guān)重要。這個(gè)比例對(duì)稅務(wù)機(jī)關(guān)，醫(yī)療監(jiān)管機(jī)構(gòu)和種植者都很重要。

THC / CBD 比率的測(cè)定
準(zhǔn)確測(cè)定 THC / CBD 比率是通過cannabis的葉、芽和花樣品的有效樣品制備來確定的。 傳統(tǒng)的樣品制備方法, 使用珠磨或研磨機(jī)來均化這些材料。 當(dāng)在聚丙烯微孔板中進(jìn)行時(shí)，這些機(jī)器施加的極-大的力通常會(huì)導(dǎo)致板損壞，導(dǎo)致開裂，泄漏并終導(dǎo)致交叉污染。

出于分析的目的，期望確定總 THC含量。這將包括無羧酸鹽形式（THCA）以及熱轉(zhuǎn)化形式－THC。 醫(yī)學(xué)價(jià)值是 CBD 含量，其再次必須總計(jì)包括天然羧酸形式。 液相色譜（HPLC）可以在轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的游離形式的 THC 和 CBD 之前鑒定 THCA 和 CBD的酸組分，因此通常優(yōu)選用于口服酊劑和cannabis產(chǎn)品。 氣相色譜（GC）分析的缺點(diǎn)是熱噴射器中 THCA 和TBDA 的破壞可能使得 THC / TBD 比率的終確定不準(zhǔn)確。
因此，HPLC / UV 或 LC / MS 應(yīng)該是優(yōu)先選的分析方法。 以下方法也可用于制劑和原料植物材料。

所需設(shè)備耗材：
• 2ml 96 孔研磨板 219030
• 研 96 孔磨板蓋墊 219004
• 真空歧管 228008
• 蛋白質(zhì)沉淀板 240100
• Porvair Sciences Minivap 96 孔螺旋針頭氮吹儀 (229206 & 229072)
• Porvair Sciences 混勻儀配 3 個(gè)適配器 (229651 & 229654)
• Porvair Sciences 2.2ml 96 孔深孔板 (219009)
• 研磨設(shè)備
 

制備方法：

• 對(duì)于 THC / CBD 比率分析，應(yīng)隨機(jī)抽取cannabis葉、芽和花的樣本（如果有的話）。我們建議在 Porvair 229030
• 植物基因組學(xué)板（研磨板）的每個(gè)孔中準(zhǔn)確稱量約 50mg 干燥的植物材料。
• 在 229030 研磨板上添加 3 x 3mm 鋼或鎳研磨球（如果研磨種子材料需要鎳）。
• 219004 蓋墊蓋住蓋板，將蓋好的蓋板放入研磨設(shè)備中。
• 以 1500 轉(zhuǎn)/分鐘研磨 2 分鐘。取下蓋墊，將干燥的研磨粉（通過 1 毫米篩）轉(zhuǎn)移到 Porvair P3 過濾
• 器微孔板（240100）的每個(gè)孔中。
• 準(zhǔn)確添加 400ul 甲醇或異丙醇（根據(jù)需要）以溶解植物材料中的油性殘余物。
• 在配有 P3 板適配器（229654）的 Porvair Microshake 混勻儀（229651）上以 330 rpm 混勻 10 分鐘。
• P3 沉淀板中的超疏水玻璃料可以防止泄漏，但為了更加安心，可以使用可選的排水蓋墊，如果需要，
• 應(yīng)在測(cè)定開始前將其安裝在板的下側(cè)（219005）。
• 搖動(dòng)后，取下排水蓋，將 P3 板放在 Porvair Microlute 上歧管（228008），在增壓室中有 2ml 收集板。這個(gè)收集板可以是另一種子基因組學(xué)板（219030）或標(biāo)準(zhǔn)的 2ml 方孔板（219009）。
• 任何 SLAS / ANSI 格式深孔板都可用于收集步驟，但是 219009 和 219030 使用不含可萃取物的聚丙烯，它不會(huì)產(chǎn)生瀝濾液。要分析的解決方案。此外，它們的板幾何形狀經(jīng)過優(yōu)化 Porvair Microlute Manifold 使得無需進(jìn)一步調(diào)整以防止孔間交叉污染。施加真空以將純化的提取物向下吸過過濾器并進(jìn)入孔中收集板。
• 使用歧管上的閥門隔離真空供應(yīng)，并使用針閥釋放增壓室中的真空。現(xiàn)在可以丟棄過濾板，并且可以將含有有機(jī)提取物的收集板帶到 HPLC 進(jìn)行分析。
• 如果優(yōu)選分析總 THC 和 CBD，則需要額外的步驟。在這種情況下，THCA 和 CBDA 必須使用熱蒸發(fā)設(shè)備轉(zhuǎn)化為 THC 和 CBD。
• 取 2ml 含有溶劑提取物的收集板，將其放在 Porvair Minivap 氮吹儀上。 ? 將溫度設(shè)定為高（60℃）并蒸發(fā)至干燥，繼續(xù)用熱氣加熱 45 分鐘，以使不穩(wěn)定的 THCA 和 CBDA 解離為 THC 和 CBD。
• 冷卻至室溫后，重新懸浮于 400μl 溶劑中，在 Microshake 混勻儀上攪拌以確保良好混合，然后如前所述進(jìn)行 HPLC 分析。